.jpg)
Test antinukleárnych protilátok (ANA) sa používa ako primárny test na hodnotenie stavu autoimunitných porúch spojivového tkaniva u pacienta. Ide o poruchy, ktoré ovplyvňujú mnoho tkanív a orgánov v celom tele. Čo ukazujú výsledky testov? Čo sú ANA? Aké choroby možno zistiť ANA?
Obsah:
- Test ANA - čo sú antinukleárne protilátky?
- Test ANA - použitie v diagnostike
- Test ANA - prítomnosť ANA v krvi zdravých ľudí
- Test ANA - ako sa volá?
- Test ANA - kedy by sa mal vykonať test ANA?
Skratka ANA pochádza z anglického názvu anti-nukleárne protilátky, čo v preklade znamená poľsky ako „antinukleárne protilátky“. Tieto molekuly patria k proteínom nazývaným autoprotilátky, čo sú proteíny, ktoré napádajú telo, ktoré ich produkuje.
Test ANA - čo sú antinukleárne protilátky?
Ľudské telo má veľa obranných mechanizmov proti patogénom. Jednou z nich je humorálna imunita. Je založená na produkcii ochranných protilátok. U zdravých ľudí imunitný systém produkuje protilátky proti cudzím antigénom.
Niekedy však existujú situácie, keď sa produkujú autoantigény, ktoré sú namierené proti bielkovinám v našom tele. Tento proces je nevyhnutný pre vznik autoimunitných chorôb.
Antinukleárne protilátky napádajú proteíny a ďalšie molekuly, ktoré tvoria jadro.
Existuje veľa rôznych typov ANA. Rozklad týchto protilátok je založený na druhoch jadrových zložiek, proti ktorým sú tieto molekuly namierené. V závislosti od typu sa ANA môžu viazať na jednotlivé proteíny aj komplexné komplexy.
Napríklad existujú protilátky proti jadrovým kanálom a histónom, to znamená molekuly, na ktorých je navinutá DNA.
Je možné rozlíšiť útočiace ANA:
- DNA
- históny
- ribonukleoproteíny
- Nukleárna RNA
- nonhistónové proteíny
Všetky uvedené komponenty sú charakteristické pre bunkové jadro.
ANA sú prítomné v krvi počas rôznych chorôb. Patria sem autoimunitné poruchy, rakovina a niektoré typy infekcií. To umožňuje použitie antinukleárnych protilátok pri diagnostike určitých chorobných stavov.
Test ANA - použitie v diagnostike
Test ANA sa používa na detekciu antinukleárnych autoprotilátok v krvi pacienta. Toto vyšetrenie je dôležité pre diagnostiku chorôb, ako sú:
- systémový lupus erythematosus
- Sjögrenov syndróm
- sklerodermia
- polymyozitída
- dermatomyozitída
- autoimunitná hepatitída
- valcovanie vyvolané reakciou na liek
Pozitívny výsledok testu ANA je diagnostický, iba ak to klinické príznaky potvrdia. Testovanie hladiny antinukleárnych protilátok môže byť tiež užitočné pri sledovaní progresie ochorenia.
Typické testy používané na zisťovanie a hodnotenie ANA sú:
- nepriama imunofluorescencia
- ELISA - enzýmový imunosorbentný test
Metóda nepriamej imunofluorescencie
Nepriama imunofluorescencia je jedným z najbežnejšie používaných testov ANA. Typicky tento test používa Hep-2 bunky. Aplikujú sa vo forme tenkej vrstvy na podložné sklíčka mikroskopu. Potom sa na ne umiestni sérum odobraté pacientovi a inkubuje sa spolu s bunkami Hep-2.
Ak sú ANA prítomné vo odobratej vzorke, zistia sa po inkubačnej dobe vo forme spojenej s antigénmi v bunkovom jadre. To je zrejmé z pridania fluorescenčnej značky, ktorá sa viaže na protilátky.
Najčastejšie sa na tento účel používa fluoresceín alebo izotiokyanát rodopsínu B. (FITC) alebo rodopsín B. Molekula fluoreskuje, keď je mu vystavený lúč svetla so špecifickou vlnovou dĺžkou. Na pozorovanie a hodnotenie fluorescencie sa používa mikroskop.
V bunkách HEp-2 možno pozorovať rôzne vzory fluorescencie v závislosti od typu protilátky prítomnej v ľudskom sére a lokalizácie antigénu. Ich analýza umožňuje určiť typy protilátok prítomných vo vzorke.
Hladiny protilátok sa určujú sériovým riedením krvného séra. Test ANA sa považuje za pozitívny, ak sa pozoruje fluorescencia pri titri 1: 40/1: 80. Výsledok nad 1: 160 má však značný diagnostický význam.
Enzýmová imunotest (ELISA)
Enzýmová imunotest (ELISA) používa na detekciu ANA mikrotitračné doštičky s antigénmi. Každá jamka doštičky je potiahnutá buď jedným alebo viacerými antigénmi. To slúži na detekciu špecifických protilátok.
Krvné sérum sa inkubuje v jamkách doštičky a potom sa vymyje. Ak boli vo vzorke antinukleárne protilátky, zostanú po premytí naviazané na príslušné antigény na mikrotitračnej doštičke.
V ďalšom kroku testu sa do jamky doštičky pridá druhá protilátka naviazaná na enzým. Enzymatická reakcia spôsobí, že roztok zmení farbu.
Farebný rozdiel je úmerný množstvu protilátok viazaných na antigén v jamke doštičky. Farbu získaného roztoku je možné hodnotiť spektrofotometrickou metódou, to znamená meraním intenzity svetelného lúča prechádzajúceho roztokom.
Test ANA - prítomnosť ANA v krvi zdravých ľudí
Odhaduje sa, že v 5% ľudskej populácie sú antinukleárne protilátky prítomné v krvi v koncentráciách považovaných za diagnosticky relevantné, bez ohľadu na prítomnosť chorobného stavu.
Pretože frekvencia ANA stúpa s vekom, až 10 - 37% zdravých ľudí vo veku nad 65 rokov má pozitívny test na prítomnosť ANA. Takéto prípady sú bežnejšie u žien ako u mužov.
Test ANA - ako sa volá?
Charakteristickou hodnotou pre test ANA je titer. Udáva stupeň zriedenia séra, pri ktorom sú antinukleárne protilátky nedetegovateľné. Čím vyššia je koncentrácia ANA v krvi, tým vyšší je titer prítomný vo výsledkoch testu.
Ak je titer vyšší ako 1: 160, odporúča sa test špecificity antinukleárnych protilátok. Tieto ďalšie testy by sa mali vykonávať v spojení s analýzou klinickej histórie pacienta a fyzickým vyšetrením. Účelom týchto krokov je diagnostikovať alebo vylúčiť autoimunitné poruchy.
Treba však poznamenať, že takýto výsledok sa vyskytuje u 5% pacientov bez ohľadu na chorobný stav. Výsledok testu je diagnostický, iba ak existujú ďalšie príznaky choroby.
Negatívny výsledok testu ANA naznačuje, že je nepravdepodobné, že by pacient mal lupus alebo iné autoimunitné ochorenie.
Test ANA - kedy by sa mal vykonať test ANA?
Test ANA sa objedná, keď príznaky pacienta naznačujú systémovú autoimunitnú poruchu. Môžu byť veľmi zrejmé a nešpecifické a môžu sa časom meniť.
Príklady príznakov zahŕňajú:
- Nízka horúčka
- Pretrvávajúca únava
- Bolesť podobná artritíde
- Červená vyrážka
- Citlivosť pokožky na svetlo
- Strata vlasov
- Bolesť svalov
- Necitlivosť alebo mravčenie v rukách alebo nohách
- Zápal orgánov a tkanív (obličky, pľúca, srdce, výstelka srdca, centrálny nervový systém a cievy)
Literatúra:
- https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
- „Témy lekárskych predmetov“. Národná lekárska knižnica. 12. februára 2013.
- „Test protijadrových protilátok: Čo to znamená“. Lupus Foundation of America. Získané 7. júna 2013
- Kumar, Y; Bhatia, A; Minz, RW (2. januára 2009). „Antinukleárne protilátky a ich detekčné metódy v diagnostike chorôb spojivového tkaniva: cesta znovu navštívená“. Diagnostická patológia
- www.autopróbciala.info
- Kavanaugh, Arthur, Tomar, Russell, Reveille, John, Solomon, Daniel H. a ďalší. Pokyny pre klinické použitie testu na protijadrové protilátky a testy špecifických autoprotilátok proti jadrovým antigénom. Archívy patológie a laboratórnej medicíny. 124 (1), s. 71-81, január 2000
_1.jpg)
Prečítajte si viac od tohto autora
---dziaanie-i-wskazania-do-stosowania.jpg)
